本发明提供了钆塞酸二钠关键前体—(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐的合成方法。以O-乙基-N-Boc-L-酪氨酸乙酯(化合物1)为原料,经红铝还原后得到O-乙基-N-Boc-L-酪氨醛(化合物2),然后再与N-Boc-1,2-乙二胺在三乙酰氧基硼氢化钠的催化下胺化还原,得到1,5-Boc双保护的(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺(化合物3),最后再以浓盐酸或氯化氢气体脱去Boc保护基得到(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐(化合物4)。本发明提出的合成路线步骤新颖简洁,无需昂贵和危险的特殊试剂,反应温和,产物易于纯化,后处理方便,适于工业化生产。
1.一种(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐的合成方法,其特征在于:以化合物1:xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="135"/>为原料,加入红铝试剂,制得化合物2:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="137"/>;然后再加入N-Boc-1,2-乙二胺,制得化合物3:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="197"/>;最后将化合物3溶于无水甲醇中,加入氯化氢或浓盐酸,制得(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="143"/>。
2.根据权利要求1所述的(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐的合成方法,其特征在于:所述的红铝试剂为红铝与吗啉配位形成的试剂。
3.根据权利要求1所述的(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐的合成方法,其特征在于:化合物2的合成方法为:1当量化合物1与2xa0~xa010当量红铝试剂,在N₂保护下,-55xa0~xa0-40xa0°Cxa0温度下反应1xa0hxa0~xa03xa0h,制得化合物2:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="137"/>。
4.根据权利要求3所述的(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐的合成方法,其特征在于:红铝试剂用量为6当量、反应温度为xa0-55xa0°C、反应时间为2xa0h时,化合物2的收率较佳。
5.根据权利要求1所述的(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐的合成方法,其特征在于:化合物3的合成方法为:1当量的化合物2、1xa0~xa01.5当量的N-Boc-1,2-乙二胺,在N₂的保护下,加入1xa0~xa04当量的三乙酰氧基硼氢化钠,催化反应2xa0~xa06xa0h,制得化合物3:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="197"/>。
6.根据权利要求5所述的(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐的合成方法,其特征在于:N-Boc-1,2-乙二胺用量为1.1当量,三乙酰氧基硼氢化钠的用量为2当量、反应时间为4xa0h,化合物3的收率较佳。
7.根据权利要求1所述的(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐的合成方法,其特征在于:化合物4的合成方法为:将化合物3溶于无水甲醇中,加入6xa0~xa08当量氯化氢或浓盐酸,常温搅拌xa06xa0~7xa0h后,除去氯化氢和甲醇,制得化合物4:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="143"/>。技术领域
本发明属于药物化学合成领域,具体涉及成人肝脏T1磁共振造影剂钆塞酸二钠关键前体—(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐的合成方法。
背景技术
钆造影剂钆塞酸二钠xa0(gadoxetatexa0disodium;商品名:Eovist)xa0由德国拜耳公司开发,于2008年7月3日获得美国食品药品管理局(xa0FDA)xa0批准上市,该药为近十年来首个在美国获得认可的器官特异性核磁共振造影剂,其主要用于成人肝脏T1xa0磁共振造影,对确诊或疑似患有肝病的患者进行检测(李珊蓉、孙铁民等,中国药物化学杂志,2008,18:xa0478)。xa0xa0xa0该诊断试剂的合成方法如图1所示:由前体—(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺开始,经5个溴乙酸丁酯取代后,水解与酸化得到(S)-1-(4-乙氧基苄基)钆塞酸,最后在氢氧化钠溶液中与三氧化二钆进行螯合,即得到目标产物—钆塞酸二钠(Inorgxa0Chem,1999,38:1134-1144)。xa0xa0该诊断试剂合成的最大难点不是如图1所示的两步工艺,而是其前体化合物—(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺的合成,文献报道的(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺的合成路线如图2所示。方法1:R₁=Cbz-NH,R₂=Hxa0(a)H₂、Pd-C,15atm,rt;xa0(b)B₂H₆∕THF,80°C,32h。方法2:R₁=Boc-NH,Cbz-NH,R₂=Hxa0(a)CF₃COOH∕CH₂Cl₂,rt,1h;xa0(b)LiAlH₄∕THF,50°C,3h。xa0xa0xa0xa0xa0方法3如图3所示。xa0方法1(Inorgxa0Chem,1999,38:1134-1144)中酰胺还原步骤所用的乙硼烷,易燃易爆毒性大,危险系数高且反应时间长,导致设备功效大大降低,在实际生产中有很多弊端。xa0方法2xa0(专利CN101007775A,xa02007-08-01)采用四氢铝锂还原,反应条件严格,危险性较高。因此,此工艺也不是理想的工业化生产方法。方法3(Inorgxa0Chem,xa01999,38:xa01134-1144)采用钯炭催化下加氢脱保护基,设备要求高,安全性不易保证;所用甲磺酰氯有剧毒,环保压力较大;xa0另外,合成步骤较繁琐。总体看,该工艺也不是最佳的生产工艺。综上所述,以上各反应工艺均存在各种问题和缺陷,需要改进。
发明内容
本发明的目的在于针对现有技术中的不足,提供一种(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐的合成方法。本发明提出的合成路线步骤新颖简洁,无需昂贵和危险的特殊试剂,反应温和,产物易于纯化,后处理方便,适于工业化生产。为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:一种(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐的合成方法,以化合物1:xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0xa0ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="130"/>为原料,加入红铝试剂,制得化合物2:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="132"/>;然后再加入N-Boc-1,2-乙二胺,制得化合物3:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="197"/>;最后将化合物3溶于无水甲醇中,加入氯化氢或浓盐酸,制得(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="143"/>,其合成路线如图4所示。所述的红铝试剂为红铝与吗啉配位形成的试剂(synthesisxa0communications,1976,8:xa0526-527)。化合物1的合成是以N-Boc-L-酪氨酸甲酯为原料,在碳酸钾存在下以DMF为溶剂经碘乙烷烷基取代后,形成酚乙醚(化合物1),收率97%。(J.Org.Chem,1981,46:xa01944-1946)。化合物2的合成方法为:1当量化合物1与2xa0~xa010当量红铝试剂,在N₂保护下,-55xa0~xa0-40xa0°Cxa0温度下反应1xa0hxa0~xa03xa0h,制得化合物2:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="132"/>;收率为52%xa0-xa078%。红铝试剂用量为6当量、反应温度为xa0-55xa0°C、反应时间为2xa0h时,收率较佳。化合物3的合成方法为:1当量的化合物2、1xa0~xa01.5当量的N-Boc-1,2-乙二胺,在N₂的保护下,加入1xa0~xa04当量的三乙酰氧基硼氢化钠,催化反应2xa0~xa06xa0h,制得化合物3:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="197"/>;收率为84%xa0~xa092%。N-Boc-1,2-乙二胺用量为1.1当量,三乙酰氧基硼氢化钠的用量为2当量,反应时间为4xa0h,收率较佳。化合物4的合成方法为:将化合物3溶于无水甲醇中,加入6xa0~xa08当量氯化氢或浓盐酸,常温搅拌xa06xa0~7h后,除去氯化氢和甲醇,制得化合物4:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="143"/>;产率为99%。本发明的有益效果在于:本发明提出的合成路线步骤新颖简洁,无需昂贵和危险的特殊试剂,反应温和,产物易于纯化,收率高,后处理方便,适于工业化生产。
附图说明
图1xa0钆塞酸二钠的合成路线;图2xa0(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺的合成路线;图3xa0(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺的合成路线;图4xa0(S)-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺三盐酸盐的合成路线。
具体实施方式
本发明用下列实施例来进一步说明本发明,但本发明的保护范围并不限于下列实施例。实施例1xa0xa0xa0xa0xa0xa0取xa0100xa0mLxa0两口反应烧瓶,N₂保护下依次加入化合物1(R)-2-(叔丁氧基羰基)氨基)-3-xa0(4xa0-乙氧基苯基)丙酸甲酯3.00xa0g(9.27xa0mmol)、20xa0mL无水甲苯,置入-40xa0°C冷阱下搅拌待用;取另一只100xa0mLxa0cock反应瓶,N_2xa0保护下加入70wt%红铝的甲苯溶液(二氢双(2-甲氧乙氧基)铝酸钠5.35xa0g(18.5xa0mmol)),然后在冰浴(0xa0°C)下滴加吗啉(1.78xa0g,20.4xa0mmol),滴加完成后继续搅拌xa02xa0h;接着将此红铝溶液缓慢滴加至第一个反应瓶中,N₂保护下,-40xa0°C反应xa03xa0h。反应完成后加NaSO₄·10H₂O(5.09xa0g,18.5xa0mmol)淬灭反应,然后加入20xa0mL乙酸乙酯稀释,抽滤后旋蒸浓缩,经柱层析(石油醚:乙酸乙酯xa0=xa010xa0:1)得白色固体1.39xa0g,即化合物2:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="132"/>;产率52%。MSxa0(ESI⁺):m/z:xa0316.2xa0[M+Na]⁺。¹Hxa0NMRxa0(400Mxa0Hz,CDCl₃)δ:xa09.63xa0(S,xa01H,xa0CHO),xa07.26~7.18xa0(m,xa02H,xa0Aromaticxa0H),xa06.85~xa06.80xa0(m,xa02H,xa0Aromaticxa0H),xa04.62~4.59xa0(m,xa01H,xa0CH),xa04.21(q,xa0Jxa0=7.0Hxa0z,xa02H,xa0CH₂CH₃),xa04.11~4.09(m,xa01H,xa0NH),xa03.72~3.68(m,xa02H,xa0CH₂),xa01.43~xa01.36xa0(m,xa012H,xa0CH₃)。Infraredxa0spectrumxa0(KBr,xa0cmxa0^-1xa0)xa0:3382;xa02982;xa02921;xa02888;xa01744;xa01711;xa01609;xa01507;xa01437;xa01364;xa01298;xa01241;xa01225;xa01176;xa01119;xa01045;xa01017;xa0980;xa0837。取100xa0mL两口反应烧瓶,N₂保护下加入化合物1(O-乙基-N-Boc-L-酪氨醛,0.5xa0g,1.70xa0mmol)、N-Boc-1,2-乙二胺,0.28xa0g(1.70xa0mmol),然后快速加入20xa0mLxa01,2-二氯乙烷搅拌溶解;随后分批缓慢加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.72xa0g,3.40xa0mmol),保持加入时间为0.5xa0h,加料完毕后,室温下继续搅拌2xa0h。反应完成后,加入20xa0mL二氯甲烷稀释,然后依次用饱和碳酸氢钠溶液、饱和食盐水、蒸馏水各30xa0mL,充分洗涤反应液。取有机相,用无水NaSO₄干燥,真空下旋蒸,最后柱层析(石油醚:乙酸乙酯xa0=xa08xa0:1)得到淡黄色油状物质0.40xa0g,即化合物3:ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="197"/>,产率为84%。MS(ESI)m/z:xa0457xa0[M+Na]⁺。¹Hxa0NMRxa0(500xa0MHz,xa0CDCl₃)δ:7.26~7.18xa0(m,xa02H,xa0Aromaticxa0H),xa06.85~6.80xa0(m,xa02H,xa0Aromaticxa0H),xa04.26xa0(s,xa01H,xa0NH),xa04.03xa0(q,xa0Jxa0=xa07.0xa0Hz,xa02H,xa0CH₂CH₃),xa04.02~xa03.97xa0(m,xa01H,xa0CH),xa03.72xa0(d,xa0Jxa0=xa06.5Hz,xa02H,xa0CH₃),xa03.72~3.68xa0(m,xa02H,xa0CH₂),xa02.89xa0~2.87xa0(m,xa02H,xa0CH₂),xa02.67~2.65xa0(m,xa02H,xa0CH₂),xa01.43~1.36xa0(m,xa021H,xa0CH₃)。Infraredxa0spectrumxa0(KBr,xa0cm^-1):xa03350;xa02982;xa02933;xa01703;xa01515;xa01454;xa01372;xa01249;xa01372;xa01249;xa01176;xa01053;xa0927;xa0804;xa0780。取xa050xa0mL两口反应烧瓶,在N₂保护下,加入化合物3(N,N-二-Boc-S-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺,0.40xa0g(0.90xa0mxa0mol)),然后加入20xa0mL无水甲醇搅拌溶解,取20xa0mL浓硫酸缓慢滴入10xa0gxa0NaCl固体中制备氯化氢,同时通入两口反应瓶中,控制滴加速度使氯化氢通入时间为0.5xa0h,然后常温下继续搅拌6xa0h。反应完成后,真空下旋蒸,得到淡黄色粉末状固体0.34xa0g,即化合物4,ntent="drawing" img-format="jpg" inline="no" orientation="portrait" wi="143"/>产率为99%。MS(ESI)m/e:xa0389.5[M+H]⁺。MS(ESI)m/e:xa0389.5[M+H]⁺。¹Hxa0NMR(500xa0MHz,xa0DMSO)xa0δ:xa09.03~8.17xa0(m,xa05H,xa0HCl),xa07.25(d,xa0J=8.4Hz,xa02H,xa0Aromaticxa0H),xa06.89(d,xa0J=8.4xa0Hz,xa02H,xa0Aromaticxa0H),xa04.12(dd,xa0J=14,xa07xa0Hz,xa01H,xa0NH)xa0,xa04.02(q,xa0J=7.0xa0Hz,xa02H,xa0CH_2xa0CH₃)xa0,xa03.99(d,xa0J=7.0xa0Hz,xa01H,xa0CH),xa03.85~3.70xa0(m,xa02H,xa0CH₂),xa03.62~3.35(m,xa06H,xa0CH₂),xa01.31xa0(t,xa0J=6.9xa0Hz,xa03H,xa0CH₂CH₃).xa0¹³Cxa0NMRxa0(DMSOd6)δ:xa0157.57xa0(s);xa0130.44xa0(d);xa0126.79xa0(s);xa0114.50xa0(d);xa062.84xa0(t);xa049.41xa0(d);xa047.83xa0(t);xa044.26xa0(t);xa035.14xa0(t);xa034.xa093xa0(t);xa014.59xa0(q)。Infraredxa0spectrumxa0(KBr,xa0cm^-1):xa03430;xa02200-3300xa0broad;xa01630;xa01580;xa01530;1480;xa01460;xa01440;xa01395;xa01305;xa01250;xa01180;xa01130;xa01050;xa0980;xa0920;xa0810。实施例2取xa0100xa0mLxa0两口反应烧瓶,N₂保护下依次加入化合物1(R)-2-(叔丁氧基羰基)氨基)-3-xa0(4xa0-乙氧基苯基)丙酸甲酯,3.00xa0g(9.27xa0mmol)、20xa0mL无水甲苯,置入xa0-40xa0°C冷阱下搅拌待用;取另一只100xa0mLxa0cock反应瓶,N_2xa0保护下加入xa070%红铝的甲苯溶液(二氢双(2-甲氧乙氧基)铝酸钠,16.1xa0g,55.5xa0mmol),然后在冰浴(0xa0°C)下滴加吗啉(5.34xa0g,61.2xa0mmol),滴加完成后继续搅拌xa02xa0h;接着将此红铝溶液缓慢滴加至第一个反应瓶中,N₂保护下,-40xa0°C反应xa03xa0h。反应完成后加NaSO₄·10H₂O(15.3xa0gxa0,55.5xa0mmol)淬灭反应,然后加入20xa0mL乙酸乙酯稀释,抽滤后旋蒸浓缩,经柱层析(石油醚:乙酸乙酯xa0=xa010xa0:1)得白色固体1.71xa0g,即化合物2,产率64%。取100xa0mL两口反应烧瓶,N₂保护下加入化合物2(O-乙基-N-Boc-L-酪氨醛,0.5xa0g,xa01.70xa0mmol)、N-Boc-1,2-乙二胺0.31xa0g(1.87xa0mmol),然后快速加入20xa0mLxa01,2-二氯乙烷搅拌溶解;随后分批缓慢加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.72xa0g,xa03.40xa0mmol),保持加入时间为0.5xa0h,加料完毕后室温下继续搅拌2xa0h。反应完成后,加入20xa0mL二氯甲烷稀释,然后依次用饱和碳酸氢钠溶液、饱和食盐水、蒸馏水各30xa0mL,充分洗涤反应液。取有机相,用无水NaSO₄干燥,真空下旋蒸,最后柱层析(石油醚:乙酸乙酯xa0=xa08xa0:1)得到淡黄色油状物质0.42xa0g,即化合物3,产率为89%。取xa050xa0mL两口反应烧瓶,在N₂保护下,加入化合物3(N,N-二-BocS-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺,0.40xa0g(0.90xa0mxa0mol)),然后加入20xa0mL无水甲醇搅拌溶解,取20xa0mL浓硫酸缓慢滴入10xa0gxa0NaCl固体中制备氯化氢,同时通入两口反应瓶中,控制滴加速度使氯化氢通入时间为0.5xa0h,然后常温下继续搅拌6xa0h。反应完成后,真空下旋蒸,得到淡黄色粉末状固体0.34xa0g,即化合物4,产率为99%。实施例3取xa0100xa0mLxa0两口反应烧瓶,N₂保护下依次加入化合物1(R)-2-(叔丁氧基羰基)氨基)-3-xa0(4xa0-乙氧基苯基)丙酸甲酯,3.00xa0g(9.27xa0mmol)、20xa0mL无水甲苯,置入xa0-40xa0°C冷阱下搅拌待用;取另一只100xa0mLxa0cock反应瓶,N_2xa0保护下加入xa070%红铝的甲苯溶液(二氢双(2-甲氧乙氧基)铝酸钠,16.1xa0g,55.5xa0mmol),然后在冰浴(0xa0°C)下滴加吗啉(5.34xa0g,61.2xa0mmol),滴加完成后继续搅拌xa02xa0h;接着将此红铝溶液缓慢滴加至第一个反应瓶中,N₂保护下,-55xa0°C反应xa02xa0h。反应完成后加NaSO₄·10H₂O(15.3xa0gxa0,55.5xa0mmol)淬灭反应,然后加入20xa0mL乙酸乙酯稀释,抽滤后旋蒸浓缩,经柱层析(石油醚:乙酸乙酯xa0=xa010xa0:1)得白色固体2.08xa0g,即化合物2,产率78%。xa0取100xa0mL两口反应烧瓶,N₂保护下加入化合物2xa0O-乙基-N-Boc-L-酪氨醛0.5xa0g(1.70xa0mmol)、N-Boc-1,2-乙二胺0.42xa0g(2.55xa0mmol),然后快速加入20xa0mLxa01,2-二氯乙烷搅拌溶解;随后分批缓慢加入三乙酰氧基硼氢化钠(1.44xa0g,xa06.80xa0mmol),保持加入时间为0.5xa0h,加料完毕后室温下继续搅拌2xa0h。反应完成后,加入20xa0mL二氯甲烷稀释,然后依次用饱和碳酸氢钠溶液、饱和食盐水、蒸馏水各30xa0mL,充分洗涤反应液。取有机相,用无水NaSO₄干燥,真空下旋蒸,最后柱层析(石油醚:乙酸乙酯xa0=xa08xa0:1)得到淡黄色油状物质0.42xa0g,即得化合物3,产率为90%。取xa050xa0mL两口反应烧瓶,在N₂保护下,加入化合物3(N,N-二-Boc-S-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺,0.40xa0g(0.90xa0mxa0mol)),然后加入20xa0mL无水甲醇搅拌溶解,取20xa0mL浓硫酸缓慢滴入10xa0gxa0NaCl固体中制备氯化氢,同时通入两口反应瓶中,控制滴加速度使氯化氢通入时间为0.5xa0h,然后常温下继续搅拌6xa0h。反应完成后,真空下旋蒸,得到淡黄色粉末状固体0.34xa0g,即化合物4,产率为99%。实施例4取xa0100xa0mLxa0两口反应烧瓶,N₂保护下依次加入化合物1(R)-2-(叔丁氧基羰基)氨基)-3-xa0(4xa0-乙氧基苯基)丙酸甲酯,3.00xa0g(9.27xa0mmol)、20xa0mL无水甲苯,置入xa0-40xa0°C冷阱下搅拌待用;取另一只100xa0mLxa0cock反应瓶,N_2xa0保护下加入70wt%红铝的甲苯溶液(二氢双(2-甲氧乙氧基)铝酸钠,26.8xa0g,92.7xa0mmol),然后在冰浴(0xa0°C)下滴加吗啉(8.90xa0g,101xa0mmol),滴加完成后继续搅拌xa02xa0h;接着将此红铝溶液缓慢滴加至第一个反应瓶中,N₂保护下,-55xa0°C反应xa03xa0h。反应完成后加NaSO₄·10H₂O(25.5gxa0,92.5xa0mmol)淬灭反应,然后加入20xa0mL乙酸乙酯稀释,抽滤后旋蒸浓缩,经柱层析(石油醚:乙酸乙酯xa0=xa010xa0:1)得白色固体2.03xa0g,即得化合物2,产率76%。xa0取100xa0ml两口反应烧瓶,N₂保护下加入化合物2(O-乙基-N-Boc-L-酪氨醛,0.5xa0g,xa01.70xa0mmol)、N-Boc-1,2-乙二胺,0.31xa0g,1.87xa0mmol,然后快速加入20xa0mlxa01,2-二氯乙烷搅拌溶解;随后分批缓慢加入三乙酰氧基硼氢化钠(0.72xa0g,xa03.40xa0mmol),保持加入时间为0.5xa0h,加料完毕后室温下继续搅拌4xa0h。反应完成后,加入20xa0mL二氯甲烷稀释,然后依次用饱和碳酸氢钠溶液、饱和食盐水、蒸馏水各30xa0mL,充分洗涤反应液。取有机相,用无水NaSO₄干燥,真空下旋蒸,最后柱层析(石油醚:乙酸乙酯xa0=xa08xa0:1)得到淡黄色油状物质0.44xa0g,即得化合物3,产率为xa092%。xa0取xa050xa0mL两口反应烧瓶,在N₂保护下,加入化合物3(N,N-二-Boc-S-1-(4-乙氧基苄基)-3-氮杂戊烷-1,5-二胺,0.40xa0g(0.90xa0mxa0mol)),然后加入20xa0mL无水甲醇搅拌溶解,取20xa0mL浓硫酸缓慢滴入10xa0gxa0NaCl固体中制备氯化氢,同时通入两口反应瓶中,控制滴加速度使氯化氢通入时间为0.5xa0h,然后常温下继续搅拌6xa0h。反应完成后,真空下旋蒸,得到淡黄色粉末状固体0.34xa0g,即化合物4,产率为99%。以上所述仅为本发明的较佳实施例,凡依本发明申请专利范围所做的均等变化与修饰,皆应属本发明的涵盖范围。